细胞培养基选品指南

细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质，也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。

由基础培养基（如MEM）和添加剂（如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子）组成，培养基的配方一直在改进，其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。

适用于人淋巴细胞、DC细胞、CIK细胞、LAK细胞等免疫细胞的无血清条件下的培养。可实现人淋巴细胞、DC细胞、CIK细胞、LAK细胞等免疫细胞的高密度培养。

（1）天然细胞培养基

天然培养基指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。其优点是营养成分丰富，培养效果良好，但缺点是成分复杂，来源受限且制作过程复杂、批间差异大。

目前广泛使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。

（2）合成细胞培养基

合成培养基是根据天然培养基的成分，用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。最早开发的基础培养基。合成培养基是根据天然培养基的成分，用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。

最早开发的基础培养基，其本质为含有盐、氨基酸、维生素和其他必需营养物的pH缓冲的等渗混合物。在此基础上，DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各种合成细胞培养基被不断开发出来。

（3）无血清细胞培养基

经历了天然培养基、合成培养基后，无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本，简化分离纯化步骤，避免病毒污染造成的危害。

无血清培养基，一般是在合成培养基的基础上，加入成份完全明确的或部分明确的血清替代成份，达到既能满足动物细胞培养的要求，又能有效克服使用血清所带来问题的目的。

（4）无蛋白无血清细胞培养基与化学组份限定无血清细胞培养基

①无蛋白无血清细胞培养基

这类培养基完全不含有动物来源蛋白，但仍有部份添加物是植物蛋白的小水解片段或合成多肽片段，以及类固醇激素和脂类前体等，以替代动物激素、生长因子的作用。其特点是完全没有蛋白或蛋白含量极低，有利于生物制品的分离纯化。

②化学组份限定无血清细胞培养基

此类培养基是目前最安全、最为理想的无血清细胞培养基，所有成份的浓度都完全明确，即使其所添加的少量蛋白，也是可经过纯化处理，成份明确、浓度确定的蛋白。这类培养基较为理想地减少了生产的可变性，提高了生产工艺的重复性，并有效降低了纯化成本。

（5）个性化细胞培养基

严格意义上来说，个性化细胞培养基不在细胞培养基的传统分类之列，其具体是指一类根据细胞特性、细胞培养工艺特点、使用者需求习惯而量身定制的细胞培养基，主要目的是提高细胞产率、产品质量、产品安全性和降低血清的使用等。

（1）细胞培养用水一般为三蒸水（经石英蒸馏器蒸馏）或超纯水，医药生产上一般为注射用水。

（2）建议尽量选择与所用量相匹配的包装一次使用，因为包装一旦打开，组分可能会变质或因受潮而结团。

（3）溶解干粉培养基时先加入终体积90%～95%的培养用水，添加剂加完后再补足。

（4）如需添加的组分较多时，某一组分完全溶解后，再添加另一组分。

（5）待培养基完全溶解后再加入碳酸氢钠，以免产生沉淀。

（6）所有成分完全溶解后，培养基应立即过滤或高压除菌，以免产生沉淀或有微生物污染。

（7）由于除菌过滤后，pH值可能会升高0.1～0.2个单位，因此在过滤前，可将pH调至比所需值低0.1～0.2个单位。

（8）在细胞培养过程中，建议不加或加少量的抗生素，如血清的浓度较低则所加抗生素的量也要相应降低一些。

（9）建议用1NHCl或1NNaOH来调节培养基的pH，因为用碳酸氢钠调pH值对培养液的渗透压影响比较大。

主要用于实验室。