发光试剂选品指南

由化学反应释放的能量引发周围的的物质使其达到激发态，被激发的物质再通过光辐射衰减能量回到基态的过程。

（1）鲁米诺试剂：化学名：3-氨基邻苯二甲酰胺。

以3-硝基邻苯二甲酸为原料与阱反应，生成中间产物3-硝基邻苯二甲酰一肚，继而把后者分子中的硝基还原为氨基，即得到化学发光物质——鲁米诺。

（2）三苯基咪唑

三苯基咪唑在碱性介质中被过氧化氢氧化，中间经过二氧杂环丁烷衍生物阶段，得到苯甲酰胺衍生物激发态，回到基态时发出荧光。

以氢化钠/1,3-二甲基苯并咪唑作催化剂，苯甲醛在四氢呋喃中发生自身缩合得到2-羟基-1，2-二苯基乙酮。在1-丁基咪唑四氟硼酸盐的存在下，后者与苯甲醛/醋酸铵发生反应得到三苯基咪唑。

（3）光泽精化合物

9-氯吖啶在铜的催化下于140℃发生偶联反应，得到9，9'-联吖啶，后者用硫酸二甲酯N-甲基化，得到光泽精。

（4）过氧化草酸酯类：例如双-草酸酯。

（5）吖啶酯类

McCap 等合成了一系列吖啶酯类化合物，对该类试剂的化学发光机理研究表明，发光效率与试剂中的可解离酸性基团的 pKa有密切关系， pKa 一般应小于 11 。

吖啶酯类化合物是一类很有前途的非放射性核酸探针标记物，用作 DNA 的发光探针，发光量子产率高，稳定性好，标记物对杂交反应的动力学和杂交体的稳定性无影响，可以直接在碱性介质中进行化学发光反应。

（1）有机酸

一般是先将有机酸衍生成荧光物质经色谱分离后进行化学发光检测。

在临床医学上，草酸是一个重要的检测项目，可以直接用氧化化学发光反应测定尿液和草酸二乙酯中的草酸盐及游离的草酸。另外还可以测定苯酮尿症病人的尿液的苯丙酮酸的含量。

此外酶联偶合反应也可以用于某些有机酸的化学发光分析。

（2）有机碱

有些碱如肾上腺素等可直接氧化而发光。

（3）氨基酸

氨基酸分析方法的改进有利于推动生物技术、基因工程、 DNA 重组和基因克隆等的发展。由于绝大多数氨基酸没有内源荧光特性，因此用过氧草酸盐体系测定氨基酸需将其衍生成荧光物质。

（4）糖类

光泽精体系可用于测定一些还原性物质，如乳糖、葡萄糖，用于抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的分析测定有很高的灵敏度。

（1）实验前，先将实验中所需的所有试剂及待测样品从冰箱中取出，待温度与室温（25℃）平衡1小时以上后使用。

（2）加样前应将所用试剂和待测样本分别充分混匀。

（3）酶结合物和抗体混匀时，切忌产生大量气泡。

（4）实验中用于冻干品复溶和稀释浓缩洗涤液所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。

（5）冻干品加入蒸馏水或去离子水后，应盖上胶塞后静置，待固体物质完全溶解后，再将试剂瓶反扣在实验台上，让附着在瓶盖上的固体物质溶解，然后充分混匀后待用。

（6）试剂每个批号均独立优化，请不要混用或稀释本试剂以免降低敏感性。

（7）适当地封闭和洗涤膜片至关重要。使用前配置化学发光试剂，配置足够覆盖膜片即可，弃去使用过的混合试剂，使用干净取样头取用每种试剂。

（1）保存条件

① 试剂盒应放置于2～8℃冰箱中存放；

② 试剂盒在取用过程中禁止颠倒，以避免试剂被污染；

③ 有特殊要求的试剂应严格按照操作说明书要求的保存条件保存。

（2）保存时间

① 未开封试剂盒于2～8℃保存时，可在有效期之内正常使用；

② 已开封试剂盒每次使用后需及时放回2～8℃冰箱内保存，应尽可能在开封后1个月内使用（按说明指示的开封的半成品有效期计算，尽量在半成品的有效期内用完）。

主要有血常规、尿常规、肝功能、肾功能、心肺功能性检查、生化检验、血清免疫检验、微生物检验、血液及骨髓学检验、组织切片病理检查等。

一般在医院的检验科或者化学实验室使用。